Antibiotic Sensitivity Testing
抗生素敏感性試驗(也稱為藥敏試驗)確定哪些抗生素對分離的細菌有效。Kirby-Bauer紙碟擴散法是最常用的技術,將含有抗生素的紙碟放在已接種的瓊脂平板上,測量抑菌圈的大小。
準備Mueller-Hinton瓊脂平板
準備純培養的細菌分離株
準備抗生素紙碟(常用:Amoxicillin、Enrofloxacin、Cephalexin等)
準備0.5 McFarland標準濁度管用於調整菌液濃度
準備無菌生理食鹽水、棉花棒和紙碟分配器
從純培養中取菌落懸浮於無菌生理食鹽水中
調整菌液濃度至0.5 McFarland標準(與標準管對比濁度)
用無菌棉花棒沾取菌液,在Mueller-Hinton平板上均勻塗布三次(每次旋轉60度)
靜置3-5分鐘使平板表面乾燥
用滅菌鑷子或紙碟分配器將抗生素紙碟放在平板上
紙碟間距至少24mm,距平板邊緣至少15mm
輕壓紙碟確保與培養基完全接觸
倒置放入37°C培養箱培養16-18小時
用尺子測量每個抑菌圈的直徑(mm)
對照標準表判定:S(敏感)、I(中間)、R(抗藥)
記錄所有抗生素的抑菌圈大小和判定結果
將藥敏報告提交獸醫師
獸醫師依結果選擇最適當的抗生素治療
妥善處理培養物和生物廢棄物
能正確執行Kirby-Bauer紙碟擴散法
通過標準:菌液濃度正確、塗布均勻、紙碟間距適當
能正確測量和判讀抑菌圈
通過標準:測量精確至±1mm,S/I/R判定正確
能正確記錄和報告藥敏結果
通過標準:報告格式完整,包含所有測試的抗生素和判定結果